随着生物医疗领域的飞速发展，深入了解和精准测量免疫系统的功能显得愈发重要。作为一种高效的技术手段，酶联免疫斑点技术（ELISpot）在这一进程中起到了至关重要的作用。借助ELISpot，研究人员能够精准量化单一免疫细胞分泌的细胞因子或其他分子，为免疫应答的研究开辟新的视角。在本期推文中，EVO视讯将带领大家探索ELISpot的世界，让我们共同揭示免疫反应背后的奥秘！

ELISpot技术简介

酶联免疫斑点技术（Enzyme-Linked ImmunoSpot Assay，ELISpot）是一种创新的细胞检测技术，基于ELISA原理。ELISpot的历史可追溯至1978年，当时牛津大学的Don Mason教授首次开发了“胶片上的斑点技术”，用于检测抗体分泌细胞。随后，1983年，科学家JD Sedgwick和C Czerkinsky独立地改进了这一技术，融入了酶联免疫的概念，并在斑点形成的过程中使其更为实用且敏感。ELISpot能够检测单一细胞分泌的细胞因子或抗体，动态监测样本中活细胞的免疫状态。

ELISpot的应用

ELISpot技术具备高灵敏度、高通量筛选和操作简便等优点，广泛应用于疫苗研发、药物筛选、感染性疾病的诊断与研究、肿瘤免疫研究、自身免疫病研究、过敏研究及移植排斥反应预测等众多免疫相关领域。通过在PVDF板上培养细胞，特异性捕获抗体会捕获细胞分泌的靶标蛋白，经适当孵育后，通过生物素化抗体的引入进行显色反应，从而形成明显的“斑点”。

FluoroSpot技术——ELISpot的进阶版

FluoroSpot是基于ELISpot发展而来的新技术，采用荧光检测替代了传统的比色法，通过混合不同波长的荧光团，可以实现多种细胞因子的精确检测。FluoroSpot保持了ELISpot的高灵敏度优势，同时允许对多种因子的多个细胞群体进行同时分析。例如，三色FluoroSpot在96孔板的PVDF膜上包被IFN-γ、IL-17A、IL-22的捕获抗体，利用不同发射波长的荧光素标记，生成不同颜色的荧光斑点，便于通过FluoroSpot分析仪进行详细的斑点计数和数据分析。

ELISpot与ELISA的对比

从技术层面看，ELISpot和ELISA都基于双抗夹心法原理，但二者的应用场景有所不同。ELISA主要用于对样本中靶标蛋白浓度的定量分析，而ELISpot旨在对样本中活细胞的免疫状态进行动态检测与评估。

通过以上的介绍，相信大家对ELISpot有了更为全面的理解。从其基本原理到实际应用，ELISpot凭借其独特的优势，在疫苗研发、肿瘤免疫治疗等多个领域展现出巨大的潜力。随着生物医疗技术的不断进步，EVO视讯相信，ELISpot将在推动人类健康事业方面发挥更大作用。欲了解更多与ELISA相关的专业知识，敬请关注EVO视讯！