颞叶癫痫（TLE）是最为普遍的癫痫类型之一，其特征是患者经历反复发作的癫痫发作，给患者及其家庭带来了巨大的生理和心理上的挑战。尽管目前市场上已有的抗癫痫药物（ASMs）在控制癫痫发作中发挥了一定作用，但它们并不能有效遏制癫痫的发展，且有可能导致药物抵抗性。最近，发表在《EMBOMolecularMedicine》上的一项研究论文“Anovelanti-epileptogenesisstrategyoftemporallobeepilepsybasedonnitricoxidedonor”提供了一种新颖治疗策略，利用一氧化氮（NO）供体预防和治疗颞叶癫痫。

研究背景

在颞叶癫痫患者中，高达70%最终可能发展成药物抵抗性癫痫（DRE），这些患者对现有临床抗癫痫药物缺乏反应，通常需要手术切除，但手术效果并非总是可靠，且伴随一定风险。因此，开发新的治疗方法势在必行。

研究结果

研究显示，TLE患者及小鼠模型中的致痫海马区的nNOS-NO水平显著下降。MRI影像揭示患者的左侧海马出现硬化，脑电图记录显示频繁的癫痫放电，而立体脑电图确认了海马为癫痫发作的发源地。RNA测序分析显示，药物难治性癫痫患者的nNOS基因表达显著降低，后续RT-qPCR和western-blot实验验证了这一发现。此外，免疫荧光染色结果表明，nNOS阳性中间神经元的丢失是导致nNOS表达下降的重要原因。

小鼠模型研究

为了探讨海马nNOS缺乏是否在癫痫发病机制中发挥关键作用，研究者们构建了一种小鼠模型，通过选择性敲除海马齿状回内神经元中的nNOS，模拟出颞叶癫痫。实验结果表明，相较于野生型小鼠，nNOS敲除小鼠在接受药物治疗后，癫痫发作累积评分显著增加，表现出更高的癫痫敏感性。而脑电图记录显示，nNOS缺失小鼠在海马齿状回区域出现自发的癫痫样尖峰放电，提示癫痫活动可能由此起源。

特定作用的进一步探索

为进一步确认nNOS在TLE中的特定作用，研究者选择性地从海马门区神经元中敲除nNOS，结果表明仅此敲除便足以诱发癫痫发作，同时不影响其他神经元。通过CRISPR/Cas9技术构建的Nos1条件性敲除小鼠模型显示，敲除的DGCs中神经元输入异常兴奋并形成过度兴奋的回路。

癫痫机制的阐明

使用狂犬病毒追踪系统，研究者验证了nNOS缺失在DGCs与其他神经元之间引发的异常连接，从而促进癫痫样活动的发生。这一发现强调了nNOS在维持正常神经回路功能中的重要性。nos1−/−小鼠对药物诱导的SE表现出高敏感性，这可能与海马DG中的兴奋性神经元的异常高兴奋性相关。

逆转nNOS缺失的效果

通过慢病毒载体补充nNOS，研究者成功逆转了TLE小鼠模型中nNOS和一氧化氮（NO）水平的降低。更重要的是，脑电图记录显示，这种补充可以有效阻止慢性癫痫的发展。长期给予DETA/NONOate——一种半衰期较长的外源性NO供体，成功阻止了TLE小鼠模型中异常兴奋输入回路的形成，显著阻止了癫痫发作的发展。

研究总结

综上所述，这项突破性的研究为颞叶癫痫治疗提供了全新视角。通过调节一氧化氮的水平，有望开发出更加有效的治疗方案，尤其是对那些目前药物无效的患者。这不仅是对现有治疗的有益补充，更是癫痫治疗领域的一次重大突破。研究中小鼠海马组织的snRNA-seq由EVO视讯提供的基因测序分析支持，nNOS-RNAi-GFP慢病毒由EVO视讯构建。